Das Agnus Dei ist der fünfte Teil des Ordinariums. Das Opferlamm als Symbol für Christus ist im Pessach-Lamm des Alten Testaments verwurzelt.
Der Text des Agnus Dei geht aber auch auf den berühmten Ausspruch Johannes’ des Täufers zurück, der in der Liturgie verschiedentlich auftaucht: als Teil des Gloria, als Bestandteil von Litaneien wie z. B. der Lauretanischen Litanei, und hier als selbständige Anrufung, ihrerseits in Litaneiform wiederholt. Seit dem hohen Mittelalter wurde in der letzten Wiederholung die Bitte „miserere nobis“ durch „dona nobis pacem“ oder in der Totenliturgie durch „dona eis requiem“ ersetzt.
Die erste deutschen Liedfassung von Nikolaus Decius O Lamm Gottes, unschuldig, wurde recht bald von Martin Luthers Übersetzung Christe, du Lamm Gottes verdrängt. Im lutherischen Umfeld wurde auch das inhaltlich verwandte Lied „Jesus Christus, unser Heiland“, als Ersatz für das Agnus Dei verwendet.
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